ノロウイルス検出キット G1/G2 -ふき取り-

本製品は、ノロウイルスのふき取り検査用試薬です。床やドアノブ、トイレの便座などをふき取り検査用綿棒でふき取り(以下、ふき取り検体と記す)、ふき取り検体に含まれるノロウイルスを濃縮し、簡便な前処理後、リアルタイム RT-PCR法で検出するキットです。
さまざまなリアルタイムPCR装置に対応するため、GI/GIIの識別が可能な3色プローブキットに加え、2波長でノロウイルスの検出が可能な2色プローブキット^*をご用意しております。
*2色プローブキットはGI/GIIの識別はできません。

●前処理は、ふき取り検体の遠心後、沈殿物の熱処理のみ
ふき取り検体に濃縮液を添加し、冷却高速遠心分離を行うことにより、迅速にノロウイルスを濃縮することができます。RNA の抽出は1 分の熱処理のみで可能です。


●検出は、1-step リアルタイムRT-PCR で可能
逆転写反応からPCR 反応までを1-step で行うため、反応途中で試薬を添加する必要はありません。

●3色プローブ [Code No FIW-101]では、GI/GIIのタイピングが可能
ノロウイルス検出キットG1/G2 -ふき取り- [Code No FIW-101]では、GI遺伝子をCy5チャネル、GII遺伝子をROXチャネルで検出しますので、GI/GIIのタイピングが可能です。

注)ノロウイルス検出キットG1/G2 -ふき取り- [Code No FIW-201]は、ノロウイルスGI.GIIの検出が可能ですが、GI/GIIを識別することはできません。

●従来のPEG 沈殿法と比較し、作業時間・反応時間が短縮
作業時間(濃縮・熱処理) は約15~30 分、リアルタイムRT-PCR の反応時間は最短45 分で、ふき取り検体からノロウイルスの検出が可能です。

ノロウイルス検出キット  G1/G2-ふき取り-

濃縮・熱処理   約15~30分  リアルタイムRT-PCR(プローブ検出) 約45分(ワンチューブ反応)

※反応時間はリアルタイムPCR装置により異なります。

●UNG処理で、キャリーオーバーのリスクが低減
偽陽性の発生原因として、キャリーオーバー汚染があります。本製品は、混入したPCR 増幅産物を分解することが可能なUracil-DNA Glycosylase(UNG) を含むため、混入したPCR 増幅産物を分解し偽陽性のリスクを低減できます。

●さまざまなリアルタイムPCR装置に対応
ノロウイルス検出キットG1/G2 -ふき取り-<3色プローブ> [Code No. FIW-101]
- FAM、ROX、Cy5が同時に検出可能なリアルタイムPCR装置に対応
(装置例)

Bio-Rad	CFX96 TouchTM Deep Well リアルタイムPCR解析システム
Roche	LightCycler® 96 システム
	LightCycler® 480 システム
Applied Biosystems®	7500FastリアルタイムPCRシステム
TaKaRa	Thermal Cycler Dice® Real Time System III (Cy5追加搭載)
	Thermal Cycler Dice® Real Time System II (Cy5追加搭載)
	Thermal Cycler Dice® Real Time System Lite (Cy5追加搭載)

ノロウイルス検出キットG1/G2 -ふき取り-<2色プローブ> [Code No. FIW-201]
- FAM・ROX、あるいはFAM・HEX/VICが同時に検出可能なリアルタイムPCR装置に対応
(装置例) 

Applied Biosystems®	7900HT リアルタイムPCRシステム
	StepOnePlusTM リアルタイムPCRシステム
TaKaRa	Thermal Cycler Dice® Real Time System III
	Thermal Cycler Dice® Real Time System II
	Thermal Cycler Dice® Real Time System Lite

不活化ノロウイルスを用いたふき取り試験

不活化GI ノロウイルス、不活化GII ノロウイルス1000、100コピーを プラスチック製バットに滴下後、綿棒 でふき取り、ノロウイルス検出キット G1/G2-ふき取り-<3色プローブ> [Code No. FIW-101]およびノロウイルス 検出キットG1/G2-ふき取り-<2色プロ ーブ>[Code No. FIW-201] における 検出を行いました。 その結果、GI、GIIともにすべて検出 され、陽性と判定されました。		ふき取り器具の溶液を廃棄し、綿棒でふき取る
		綿棒を絞り、ふき取った溶液を回収する
		ふき取り検体300μLと濃縮液300μLを混合する
		冷却高速遠心分離する(4℃・15,000rpm・5分)
		上清を除去する
		前処理液5μLを添加し、85℃・1分間の熱処理
		1-step リアルタイムRT-PCRで増幅する

[FIW-101]
使用装置 : Bio-Rad CFX96 Touch^TM Deep Well リアルタイムPCR解析システム

※GIはCy5, GIIはROX, 内部標準(IC)はFAMチャネルで測定します。
　紫色の増殖曲線がGI, オレンジ色がGII, 青色はICの増殖を示します。

[FIW-201]
使用装置 : Applied Biosystems^® StepOnePlus^TMリアルタイムPCRシステム


※GI, GIIはFAM, 内部標準(IC)はVICチャネルで測定します。
　緑色の増殖曲線がGI/GII, 青色はICの増殖を示します。

 (参考)ノロウイルスの流行株の判定や感染源の特定における弊社キットの活用例 - * -  * -

 (配列解析用サンプル調製)イノシンを含むプライマーを用いた1-step RT-PCRによるノロウイルス遺伝子の増幅